無菌實驗室使用及操作要求

一、無菌操作間使用要求

　　1. 無菌操作間通向外面的窗戶應(yīng)為雙層玻璃，并要密封，不得隨意打開，并設(shè)有與無菌操作間大小相應(yīng)的緩沖間及推拉門，另設(shè)有0.5-0.7m2的小窗，以備進入無菌操作間后傳遞物品。實驗室規(guī)劃無菌試驗室-潔凈實驗室-生物安全實驗室的建設(shè)方案包括：建筑布局和裝修、空氣調(diào)節(jié)、給排水、氣體供應(yīng)、電氣設(shè)計、集中控制、安防、施工工藝、檢測、培訓(xùn)等多方面內(nèi)容。實驗室裝修高效安全的手術(shù)室空氣凈化系統(tǒng)，保證手術(shù)室的無菌環(huán)境，可以滿足器官移植、心臟、血管、人工關(guān)節(jié)置換等手術(shù)所需的高度無菌環(huán)境。采用高效低毒消毒劑，以及合理使用，是保障一般手術(shù)室無菌環(huán)境的有力措施。實驗室建設(shè)不同級別的層流手術(shù)室其空氣潔凈度標準不同，例如國內(nèi)標準I級層流手術(shù)室的標準為潔凈度5級，每立方尺空氣中≥0.5μm的塵粒數(shù)，≤100顆或每升空氣中≤3.5 顆。II級層流手術(shù)室的標準為潔凈度6級，每立方尺空氣中≥0.5μm的塵粒數(shù)，≤1000顆或每升空氣中≤35顆。III級層流手術(shù)室的標準為潔凈度7級，每立方尺空氣中≥0.5μm的塵粒數(shù)，≤10000顆或每升空氣中≤352顆。依次類推。

2、無菌操作間應(yīng)保持清潔。工作完畢后，用2%3%的煤-苯酚皂溶液消毒，擦拭工作臺表面，與實驗無關(guān)。

3.使用前后，應(yīng)將門緊緊關(guān)閉，并打開紫外燈。如果室內(nèi)懸浮紫外燈用于消毒，則需要30W紫外燈，距離為1.0m，照射時間不小于30min，應(yīng)使用紫外燈。請勿在紫外線下直接操作以免損壞。應(yīng)每隔兩周用酒精棉球輕輕擦拭燈泡，去除灰塵和油脂，以減少紫外線穿透的影響。

　　4. 處理和接種食品標本時，進入無菌操作間操作，不得隨意出入，如需要傳遞物品，可通過小窗傳遞。

5.如無菌手術(shù)室需要空調(diào)，應(yīng)設(shè)有過濾裝置。

二、 無菌操作要求

食品微生物實驗室工作人員必須有嚴格的無菌概念，在無菌條件下進行多次試驗。主要原因如下：一是防止樣品在試驗操作中造成污染，二是保證工作人員的安全，防止病原菌操作不當造成的個人污染。

　　1.接種細菌時必須穿工作服、戴工作帽。

二。接種食品樣品時，必須穿戴特殊工作服、帽子和拖鞋，放置在無菌室的緩沖室，并在工作前進行紫外線消毒后使用。

3.注射食物樣本時，在進入無菌室前先用肥皂洗手，然后用75％酒精棉球擦拭雙手。

　　4. 進行接種所用的吸管，平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌，打開包裝未使用完的器皿，不能放置后再使用，金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用95%酒精點燃燒灼三次后使用。

5.當秸稈從包裝袋中取出時，吸管的頂端不能接觸到外露的部分。當?shù)静萁臃N在試管或平板中時，吸管的頂端不得接觸試管或平板的邊緣。

　　6. 接種樣品、轉(zhuǎn)種細菌必須在酒精燈前操作，接種細菌或樣品時，吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。

　　7. 接種環(huán)和針在接種細菌前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼全部金屬絲，必要時還要燒到環(huán)和針與桿的連接處，接種結(jié)核菌和烈性菌的接種環(huán)應(yīng)在沸水中煮沸5min，再經(jīng)火焰燒灼。

8.吸管吸收細菌液體或樣本時，使用相應(yīng)的橡膠頭吸收，不要直接用嘴吸。